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　　大鼠三碘甲狀腺原氨酸(T3)ELISA試劑盒實驗使用說明書如下：

　　實驗原理?

　　本試劑盒采用雙抗體夾心法測定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中的三碘甲狀腺原氨酸(T3)含量。首先用純化的大鼠T3抗體包被微孔板，形成固相抗體。隨后依次加入待測樣本中的T3和HRP標(biāo)記的T3抗體，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物。洗滌后加入底物TMB顯色，TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化為藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化為黃色。顏色的深淺與樣品中的T3濃度呈正相關(guān)，通過酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值)，并利用標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中T3的濃度?。

　　BS-3457  大鼠三碘甲狀腺原氨酸(T3)ELISA試劑盒  96T/48T

　　試劑盒組成?

　　30倍濃縮洗滌液?：20ml×1瓶

　　酶標(biāo)試劑?：6ml×1瓶

　　酶標(biāo)包被板?：1塊(96孔)

　　標(biāo)準(zhǔn)品(240ng/ml)?：1瓶

　　顯色液A?：1瓶

　　顯色液B?：1瓶

　　終止液?：6ml×1瓶

　　說明書?：1份?。

　　實驗步驟?

　　樣本準(zhǔn)備?：將大鼠血清或血漿樣本離心后取上清液，避免溶血或脂血?。

　　加樣?：依次向包被板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和待測樣本，每孔50μL?。

　　孵育?：37℃孵育30分鐘，洗滌5次?。

　　加酶標(biāo)試劑?：每孔加入50μL HRP標(biāo)記的T3抗體，37℃孵育30分鐘，洗滌5次?。

　　顯色?：每孔加入50μL顯色液A和50μL顯色液B，避光反應(yīng)15分鐘?。

　　終止反應(yīng)?：每孔加入50μL終止液，輕輕混勻?。

　　測定?：使用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定各孔OD值?。

　　結(jié)果計算?

　　繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線?：以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線?。

　　計算樣本濃度?：根據(jù)樣本OD值，從標(biāo)準(zhǔn)曲線中查得對應(yīng)的T3濃度?。

　　注意事項?

　　試劑保存?：未開封試劑盒保存于2-8℃，開封后酶標(biāo)板需密封保存于-20℃?。

　　操作規(guī)范?：避免交叉污染，使用一次性吸頭，洗滌?。

　　樣本處理?：避免反復(fù)凍融樣本，確保樣本新鮮?。

　　實驗環(huán)境?：保持實驗室溫度、濕度穩(wěn)定，避免強(qiáng)光直射?。

　　適用范圍?

　　本試劑盒適用于定量測定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中的三碘甲狀腺原氨酸(T3)含量，用于甲狀腺功能相關(guān)研究?。

　　技術(shù)參數(shù)?

　　檢測范圍?：4ng/ml-120ng/ml?。

　　檢測限?：47.4pg/mL?。

　　保質(zhì)期?：12個月?。

　　以上為大鼠三碘甲狀腺原氨酸(T3)ELISA試劑盒的詳細(xì)使用說明，實驗操作需嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行，以確保結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性?。