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人干擾素誘導(dǎo)蛋白44Elisa試劑盒說明書
更新時間:2024-05-22瀏覽:786次

  人干擾素誘導(dǎo)蛋白44Elisa試劑盒說明書

  人干擾素誘導(dǎo)蛋白44(IFI44)Elisa試劑盒。本說明書將為您提供詳細(xì)的使用指南,以確保您能夠準(zhǔn)確、有效地進(jìn)行實驗操作。請您在使用前仔細(xì)閱讀,并按照步驟進(jìn)行操作。

  一、產(chǎn)品概述 本試劑盒采用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中人干擾素誘導(dǎo)蛋白44(IFI44)的水平。通過純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,與待測樣品中的人干擾素誘導(dǎo)蛋白44結(jié)合,再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物。經(jīng)過洗滌后,加入底物TMB顯色,以測定樣品中IFI44的含量。

  二、實驗準(zhǔn)備

  1. 請確保實驗環(huán)境清潔,避免污染。

  2. 將試劑盒及所需試劑置于室溫下平衡30分鐘。

  3. 準(zhǔn)備實驗所需的加樣器、移液管、試管等器材,并確保其清潔干燥。

  三、操作步驟

  1. 加樣:按照實驗設(shè)計,分別設(shè)置空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔和待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上準(zhǔn)確加樣50μl標(biāo)準(zhǔn)品,待測樣品孔中先加入40μl樣品稀釋液,再加入10μl待測樣品(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣時請注意,樣品應(yīng)加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

  2. 溫育:用封板膜封板后,將酶標(biāo)板置于37℃恒溫箱中溫育30分鐘。

  3. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水稀釋20倍,備用。

  4. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干。每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

  5. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

  6. 再次溫育:同步驟2。

  7. 再次洗滌:同步驟4。

  8. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,置37℃避光顯色15分鐘。

  9. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

  10. 測定:在加終止液后15分鐘以內(nèi),使用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定各孔的光密度(OD值)。

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