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　　BUNSEN本生：PCR板封膜正確的貼膜方法

　　如何給96孔PCR板封膜，確保封板膜與96孔板親密貼合，防止液體蒸發(fā)，才能保障實驗順利。BUNSEN本生小編分享如何正確地封膜?

　　第1步 將封板膜貼在板子上從自封袋中取出單張封板膜，然后重新封好自封袋，以保持其中的無酶環(huán)境。如下圖所示，保持底襯面朝上，握住封板膜，沿著切線處慢慢撕下底襯。

　　隨后，將封板膜粘性面的一端貼在板子上，掌握好距離和角度，避免后續(xù)貼歪。貼的過程中一端貼，另一端拉住。

　　注：一定要戴手套

　　如果使用單端標(biāo)簽的封板膜，則將襯紙部分除去，然后將封板膜錨固到板上，使其密封在整個板上，然后繼續(xù)除去襯紙。這種方法可以消除封板膜產(chǎn)生的卷曲和回滾。

　　如果使用兩個末端標(biāo)簽的產(chǎn)品，請以連續(xù)平滑的方式剝離中心襯紙。緩慢剝離內(nèi)襯可以程度地減少卷曲。注意不要接觸薄膜的粘合表面。

　　第2步 壓膜

　　使用壓膜板緩慢刮壓封板膜，使其全部密封到板上。假如沒有專用的壓膜板，可以找一個邊緣光滑的卡，比如沒有錢的銀行卡或公交卡等。壓膜步驟應(yīng)至少水平和垂直執(zhí)行兩次。施加足夠的力(也別太大力)對于獲得良好的密封性至關(guān)重要。如下圖A和B所示，水平兩次，垂直兩次。

　　將壓膜板沿著孔板的所有外邊緣刮壓至少兩次，確保施加堅定而持續(xù)的壓力。如上圖C和D所示，孔間和邊緣要都要壓一遍。為了好結(jié)果，要耐心。將封板膜正確密封到板上之后，沿切線撕下接頭部分。

　　注：

　　壓膜的時候，另一只手要穩(wěn)住板子，避免板子劇烈晃動

　　第3步 檢查

　　密封后仔細檢查平板，確認(rèn)薄膜與板之間是否緊密貼牢。確認(rèn)每個孔周圍的粘貼痕跡，平板的整個表面(包括周邊)都被密封，以及膜上是否有液體。封板膜不應(yīng)出現(xiàn)褶皺，如果觀察到皺紋，則說明板未正確密封。

　　注：

　　注意對于邊緣凸起的平板，封板膜在板上定位可能不正確，要避免膜向上延伸到板的側(cè)壁上在開始PCR實驗前之前將密封的平板放置至少10分鐘，封板膜的粘合力將隨著時間增加有條件話，使用孔板專用離心機離心。

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